Bilirubiinipulber CAS 635-65-4ekstraheeritakse peamiselt sapist. Bilirubiin ei lahustu vees, lahustub orgaanilistes lahustites nagu benseen, kloroform ja süsinikdisulfiid ning lahustub veidi etanoolis ja eetris. Bilirubiini võib lahustada ka kuumas etanooli ja kloroformi segus. Bilirubiini naatriumsool on vees kergesti lahustuv, kuid selle kaltsiumi-, magneesiumi- ja baariumisoolad on vees lahustumatud. Bilirubiin on heleoranži või sügavpunakaspruuni värvusega monokliiniline kristall. Selle kuiv tahke aine on suhteliselt stabiilne ja kloroformi lahus on suhteliselt stabiilne ka pimedas. See on leeliselises lahuses (nagu 0,1 mmol/L naatriumhüdroksiid) või kolmevalentsete raua ioonidega kokku puutudes ebastabiilne ja oksüdeerub kiiresti biliverdiiniks. Bilirubiin võib seonduda glütsiini, alaniini või histidiiniga. Seerumivalgu, vitamiinide või EDTA lisamine võib bilirubiini stabiliseerida.
1. Kaltsiumisoola valmistamine kaltsiumisoola kaudse ekstraheerimise meetodil: lisage segades värskesse seasappi 3-3,5 korda küllastunud lubjavee supernatanti ja jätkake segamist 5-10min, Ph{ {4}}, eemaldage marli abil 50 kraadini kuumutamisel tekkinud vaht, jätkake kuumutamist keemiseni, hoidke 2 minutit, jahutage, filtreerige ja hankige kaltsiumsool. Bilirubiini valmistoote valmistamine: võtke kaltsiumsool ja lisage pasta saamiseks 0,8-kordne kogus vett, sõeluge see läbi 30-40 võrgusilma, lisage filtraadile 0,3% antioksüdanti, lisage sool ja hape. pH reguleerimiseks 1,5-ni, laske 4 tundi seista, filtreerige, lisage filtrikoogile 8-10-kordne kogus 80% etanooli, purustage ja segage hästi, lisage antioksüdant, laske üleöö seista ja saadakse sade. Lisage 4-6-kordne kogus 80% või rohkem etanooli ja antioksüdanti, segage ja leotage üleöö. Korrake seda protsessi 3-4 korda ja kuivatage sade alla 70 kraadi, et saada valmis bilirubiiniprodukt.
Kaltsiumisoolade sadestamine [HCl, raske naatriumsulfit] → sadestamine [etanool, raske naatriumsulfit] → sadestamine [70 kraadi] → bilirubiiniprodukt.
2.Katsiumbilirubinaadi valmistamine kloroformi ekstraheerimise meetodil: värske seasapi pH reguleeritakse naatriumhüdroksiidiga 12-ni, kuumutatakse keemiseni, lisatakse kaltsiumkloriidi lahust, seejärel kuumutatakse keemiseni, jahutatakse, filtreeritakse kaltsiumbilirubinaadi saamiseks. Seasapp [NaOH, CaCl2] → [pH 12, 100 kraadi ] Bilirubiinipulbri valmistamine CAS 635-65-4 kaltsiumsool bilirubiini lõpptoode: bilirubiini kaltsiumsoola pH reguleeritakse 1:1 vesinikkloriidhappega 1-2, happeline vesi kurnatakse, kloroform ekstraheeritakse kloroformiga, pestakse veevaba etanooliga ja lahus jäetakse umbes 5 kraadini, et saada bilirubiiniga lõpptoode.
Bilirubiini kaltsiumsool [HCl] → [pH1-2] happeühend [kloroform, veevaba etanool] → [5 kraadi ] bilirubiini lõpptoode
3. Täiustatud kaltsiumsoola meetod kaltsiumisoola hapestamiseks: võtke värske seasapp ja lisage 1% kaltsiumhüdroksiidi, segage hästi, kuumutage kiiresti 90-97 kraadini, hoidke soojas 10 minutit ja filtreerige, et saada. kaltsiumi sool. Kuumutamine 40 kraadini põhjustab rasva, mille saab õrnalt eemaldada. Saadud kaltsiumsoola võib üleliigse leelise ja muude lisandite eemaldamiseks pesta üks kord kuuma veega. Võtke kaltsiumisool ja lisage rohkem kui 10 korda suurem kogus vett, et see ühtlaselt hajutuks. Lisage 1% antioksüdanti ja segage (60 r/min), et lisada tilkhaaval 1:2 vesinikkloriidhape. 40 minuti jooksul saavutage pH 2,0 ja oodake, kuni pH jääb muutumatuks, et saada happeline aine. Seasapp [1% kaltsiumhüdroksiidi] → [90-97 kraad , 15min] Sappkaltsiumisool [antioksüdant, vesinikkloriidhape] → [pH2,40min] Happeline alkoholipesu, vesipesu: Hapestunud bilirubiin jaotub toatemperatuuril ühtlaselt 10-kordse etanoolikoguse korral ei tohiks pH olla kõrgem kui 5, lisatakse 0,5% antioksüdanti, segatakse ja jäetakse umbes 1 tunniks kihistamiseks. Minge alkoholilahuse ülemisse kihti ja koguge sadestunud bilirubiin. Peske bilirubiini 50 kraadise sooja veega umbes 5 minutit, koguge hõljuv bilirubiin, lisage kiiresti dehüdratsiooniks etanool ja eemaldage toorbilirubiini saamiseks etanool. Happeline ühend [etanool] → [1 h] sadestab bilirubiini [50 kraadi kuuma vett] → [etanool] toorbilirubiini ekstraheerimine, aurustamine, kristallimine ja kuivatamine: võtke toorbilirubiin ja lisage 10 korda kloroform, et loksutada 50 kraadi juures 10 minutit. Vajadusel ekstraheerige 2-3 korda ja jääk peaks olema valge. Kloroformi ekstrakti destilleeriti vaakumdestilleerimisel kuni peaaegu kuivamiseni, mille tulemusena moodustus enamik bilirubiini kristalle. Pärast jahutamist toatemperatuurini lisati etanool ja jahutati 10 minutit 4 kraadini. Bilirubiini kristallid filtriti ja töödeldi veevaba etanooli või eetriga, millele järgnes kõrgekvaliteedilise bilirubiini saamiseks vaakumkuivatus.
Toorbilirubiin [kloroform] → [10 min] kloroformilahus [kristallisatsioon] → kvaliteetne bilirubiin
4. Hüdrolüüsilahuse valmistamine ioonvahetusvaigu ekstraheerimise meetodil: Võtke värske lehma sapp, filtreerige see marli abil, lisage 2 mol/L naatriumhüdroksiidi lahust pH reguleerimiseks 10-ni, segades, keetke ja filtreerige hüdrolüsaadi saamiseks.
Sapphappe adsorptsioon ja elueerimine hüdrolüüsilahuse vaigukolonniga: Valage keedetud hüdrolüüsilahus eelkuumutatud vaigukolonni, kuni heitvee värvus muutub tumedamaks ja adsorptsioon on küllastunud.
Lisage külma vett, kuni temperatuur kolonnis langeb toatemperatuurini, ja seejärel lisage kolonni ülaosast lahjendatud naatriumvesiniksulfitvesinikkloriidi lahust, et heitvee pH oleks 1.
Peske 75% etanooliga, koguge, kui eluent on tumeroheline hägune lahus, ja peske, kuni heitvesi muutub selgeks ja pH on peaaegu neutraalne. Peske uuesti 95% etanooliga.
Koguge etanooli elueerimislahus sapphappe valmistamiseks. Hüdrolüüsilahus [ioonivahetuskolonn] → [75% etanool, 95% etanool] Etanooli eluent bilirubiini elueerimiseks, kontsentreerimiseks ja kuivatamiseks: vabastage kogu 95% etanool kolonnist, leotage kloroformis 10 minutit ja koguge kloroformi eluent, kuni eluent ei lahustu. ilmub kollane värv.
Destilleerige kloroformi eluent peaaegu kuivaks, lisage veevaba etanool ja jätkake kogumist, kuni kloroformi kaob. Filtreerige kuumalt, koguge bilirubiin, kuivatage ja saage valmis bilirubiiniprodukt.
Yolanda
Mobiil: +86 -29-86107037-8012
Tel/Wechat : 18729555803